EndoFree Plasmid Kits基于陰離子交換技術(shù)，可快速制備不含內(nèi)毒素的質(zhì)粒DNA。QIAfilter Cartridges過濾快速澄清裂解液。制備的DNA純度超過兩次CsCl梯度離心法所得DNA的純度，適合超轉(zhuǎn)染級(jí)純的應(yīng)用。EndoFree Plasmid Buffer Set可用于制備10次mega規(guī)模或5次giga規(guī)模轉(zhuǎn)染級(jí)純質(zhì)粒或科斯質(zhì)粒DNA制備。

EndoFree Plasmid Kit將高效的內(nèi)毒素去除步驟整合到質(zhì)粒純化流程中，不需要額外步驟，也不需用親和柱去除脂多糖。通過QIAfilter Mega-Giga Cartridge過濾細(xì)菌裂解液，并使用重力流QIAGEN-tip陰離子交換柱純化質(zhì)粒DNA。產(chǎn)量可達(dá)10 mg（Giga）、2.5 mg（Mega）、500 μg（Maxi）DNA。純化的DNA無內(nèi)毒素（<0.1 EU/μg DNA）。

EndoFree Plasmid Kits去除細(xì)菌在裂解過程中釋放的內(nèi)毒素，內(nèi)毒素會(huì)影響原代細(xì)胞和敏感培養(yǎng)細(xì)胞的DNA轉(zhuǎn)染。從EndoFree Plasmid Kits得到的無內(nèi)毒素DNA高度適用于可重復(fù)且結(jié)果可靠的轉(zhuǎn)染。QIAGEN超純無內(nèi)毒素DNA也適用于基因治療研究和其他敏感應(yīng)用。

在堿性條件下，細(xì)菌細(xì)胞裂解，使用QIAfilter Mega-Giga Cartridge清除粗裂解物。將Endotoxin Removal Buffer加入到過濾后的裂解液中。冰浴后，將純凈的裂解物上樣到陰離子交換柱上，在適當(dāng)?shù)牡望}和pH條件下，質(zhì)粒DNA選擇性結(jié)合。用中鹽緩沖液清除RNA、蛋白質(zhì)、代謝產(chǎn)物和其他低分子量雜質(zhì)，超純質(zhì)粒DNA被高鹽緩沖液洗脫。最后DNA由異丙醇脫鹽、沉淀并且離心回收。

使用EndoFree Plasmid Kits純化的DNA適合多種敏感應(yīng)用，包括：

1. 轉(zhuǎn)染，包括原代、敏感以及懸浮細(xì)胞

2. 基因治療研究

3. 基因沉默

4. 顯微注射

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：

1. 純化得到的DNA內(nèi)毒素水平低于0.1 EU/μg

2. 純化流程快，同時(shí)去除內(nèi)毒素

3. 獲得高產(chǎn)量、高拷貝質(zhì)粒DNA

4. 使用LyseBlue，獲得最佳的裂解和高產(chǎn)量的DNA

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