懸浮細胞傳代是一項重要的實驗操作,它可以幫助研究人員擴增和維持細胞株。懸浮細胞如何進行傳代呢？

一、懸浮細胞的傳代

懸浮細胞傳代比貼壁細胞傳代稍微簡單一些。由于細胞已經在生長培養基中懸浮，因此無需通過酶的作用使其從培養容器表面脫離，整個過程較為迅速，對細胞的損傷也較小。懸浮生長細胞的傳代培養要比貼壁細胞簡單得多，通常有兩種方法。

1. 直接給帶傳代的培養瓶中補充一定量的新鮮.培養基，然后將進行分裝。

2. 先通過離心棄掉營養匱乏的舊培養基，然后再用適量的新鮮培養基重懸細胞沉淀，最后將其分裝至培養瓶中即可。

懸浮細胞傳代后的延滯期一般比貼壁細胞短。

二、所需材料

★ 裝有懸浮細胞的培養容器

★ 完quan生長培養基，預熱至37%

★ 37°培養箱，充有二氧化碳濃度為5%的濕化空氣

三、懸浮細胞傳代流程

所有與細胞接觸的溶液和設備均應為無菌狀態必須采用正確的無菌技術，并且在超凈臺內進行。傳代應在細胞處于對數期、未達到匯合狀態時進行。達到匯合狀態時，懸浮培養的細胞會聚集成團塊，轉動培養瓶時培養基會變得渾濁。傳代前所建議的最大細胞密度隨細胞系不同而有所差異;詳細信息請參閱針對具體細胞的立品說明書或操作手冊。

四、懸浮細胞的傳代方法

1、直接傳代法

①待懸浮細胞長滿至80%-90%左右 (細胞懸液變黃)，即可傳代；

②用吸管吸棄細胞懸液1/2~ 2/3 ；

③加入適量的新鮮培養基，繼續培養。

2、離心傳代法

①將細胞懸液轉移到離心管內；

②150g離心5min，棄上清；

③使用新鮮的培養基重懸細胞;

④吸管吸取適量細胞懸液，裝入新的培養瓶，再加入適量的新鮮培養基，繼續培養。

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