1.簡介

DEAE SepFast 6HF Plus是弱陰離子交換介質(zhì)。結(jié)合容量和結(jié)合動力學(xué)高于IEX  SepFast  6HF系列。該離子交換層析介質(zhì)特別適用于需要增加結(jié)合能力的生物分子的一般大規(guī)模純化。

DEAE SepFast 6HF Plus在配體密度、負載量和單個組分的分離能力之間進行了平衡設(shè)計，適用于大規(guī)模生物制造應(yīng)用。

DEAE SepFast 6HF Plus的基質(zhì)由高度交聯(lián)的 6%瓊脂糖和葡聚糖制成，具有優(yōu)異的流動性。它對生物加工行業(yè)中遇到的大多數(shù)化學(xué)條件都非常穩(wěn)定。

2.產(chǎn)品特性

表1 DEAE SepFast 6HF Plus的特性

*測試條件：10  mM緩沖液 pH  7.5，上樣5 mg/ml 蛋白質(zhì)，停留時間5分鐘，50%穿透。

**在 32  mm內(nèi)徑色譜柱中，床高 15 cm，室溫下用水測量。

圖1 IEX  SepFast  Media的壓力-流動特性

（備注：將基礎(chǔ)基質(zhì)填充到32 mm內(nèi)徑的柱子中，最終床?為15 cm。流動相是去離子水。測試在室溫下進行）

圖2 滴定曲線

3.方法優(yōu)化

建議在載量、流速、結(jié)合pH值、結(jié)合離子強度、洗脫速度和梯度等參數(shù)之間進行篩選。由于DEAE SepFast 6HF Plus的快速孔隙可及性，結(jié)合步驟可以在比洗脫步驟更快的流速下完成。建議特別注意優(yōu)化洗脫條件以獲得最佳分離能力。

強離子交換介質(zhì)可以在較寬的pH范圍內(nèi)保持其電荷（并因此保持其功能），而弱離子交換介質(zhì)的離解程度和離子交換容量隨pH值而變化。因此，如果使用弱離子交換介質(zhì)，優(yōu)化pH值更為關(guān)鍵。

通常，在優(yōu)化方法時，平衡組分分離度與工藝產(chǎn)量是主要考慮因素。此外，對于不穩(wěn)定或對剪切力敏感分子的純化，需要優(yōu)化操作條件以平衡產(chǎn)量和對目標(biāo)分子可能造成的損害。

4.裝柱

DEAE SepFast 6HF Plus由高度交聯(lián)的珠狀瓊脂糖制成，具有出色的機械強度。該介質(zhì)可以很容易地以任何可能的填充方式填充到任何類型的色譜柱中。典型的包裝壓力高達3 bar。

5.保養(yǎng)

根據(jù)不同的應(yīng)用，介質(zhì)可能會被多次使用。如需重復(fù)使用，請參閱以下說明。

（1）再生

每次運行后，用高離子強度溶液（例如1M NaCl緩沖液）或增加pH 值。

（2）就地清洗  (CIP)

CIP是一種去除強結(jié)合物質(zhì)的程序，例如再生后殘留在吸附劑表面的脂質(zhì)、內(nèi)毒素和變性蛋白質(zhì)。定期 CIP 可防止污染物在填充床中積聚，并有助于保持色譜柱性能。

應(yīng)根據(jù)存在的污染物類型為每個過程制定具體的 CIP程序。CIP 的頻率取決于各個應(yīng)用的性質(zhì)。

以下信息可作為一般指導(dǎo)：濃度高達2 M的鹽可用于清除因離子相互作用而結(jié)合的雜質(zhì)。疏水性結(jié)合的污染物可以通過以下試劑去除：1 M NaOH、低比例的非離子洗滌劑（例如0.1-2%）、堿性或酸性條件下的30%  異丙醇（例如在乙酸或磷酸存在下）。也可以探索上述試劑的組合。一般來說，孵育時間應(yīng)該更長（例如從 30 min到2 h），以確保污染物WAN全解離。

（3）消毒

建議使用接觸時間為1 h的0.5?1.0 M NaOH進行消毒。

6.儲存

DEAE SepFast 6HF Plus應(yīng)儲存在20%乙醇中（強陽離子交換介質(zhì)含有0.2 M NaAC）以防止微生物生長。將介質(zhì)存儲在4℃到30℃的溫度下。使用前，用至少5床體積的運行緩沖液來平衡介質(zhì)。

7.更多信息

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8.訂購信息